磷(lin)酸化(hua)(hua)是細胞(bao)(bao)內最常見和(he)(he)最重要的蛋(dan)白質翻譯后修飾(shi)之一。蛋(dan)白質的磷(lin)酸化(hua)(hua)和(he)(he)去磷(lin)酸化(hua)(hua)作為一種“分(fen)子(zi)開關”，通過(guo)(guo)影(ying)響蛋(dan)白質的結構、定(ding)位和(he)(he)功(gong)能，在細胞(bao)(bao)的信號轉導、轉錄翻譯、代謝(xie)和(he)(he)發育等生命過(guo)(guo)程中發揮著重要作用。在真(zhen)核細胞(bao)(bao)中，大約 1/3 的蛋(dan)白質會被磷(lin)酸化(hua)(hua)。
盡管磷酸化蛋白的數目相對較多，但磷酸化多肽在總酶切多肽中的占比并不高，據推測可能不足 5%，大量非磷酸化蛋白的存在會對磷酸化蛋白的鑒定造成一定的挑戰。近年來不斷有各種磷酸化富集方法的報道，使得磷酸化蛋白質和磷酸化位點的鑒定數目有了大幅度的提高，目前最常用的是親和色譜法，包括IMAC,Fe-NTA和TiO2等。
青蓮百奧推出了基于Ti-IMAC材料的磷酸化肽段富集試劑盒，利用金屬離子Ti與磷酸基團之間的特異性相互作用富集磷酸化肽段，富集能力是常規固定化金屬離子親和色譜法（Fe3+-IMAC）的3倍以上，與TiO2相比可以提高約30%，富集特異性可達95% [1]。
青蓮百奧磷酸(suan)化肽(tai)段富(fu)集試劑盒(he)——PEB2
測(ce)(ce)(ce)試(shi)使用(yong)(yong)100ug Hela細胞肽段，在DIA的數據(ju)采集模式下使用(yong)(yong)QE-HFX進行質譜檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)，檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)梯度(du)60min。最終檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)(ce)到24,000+磷酸(suan)(suan)化(hua)位點，22,000+磷酸(suan)(suan)化(hua)肽段和(he)3,600+磷酸(suan)(suan)化(hua)蛋白。其(qi)中，多位點磷酸(suan)(suan)化(hua)蛋白數量占(zhan)比近40%。
高效的富(fu)集能力：26000+位點
穩定的富集能(neng)力(li)：富集效率維持(chi)在90%以(yi)上(shang)
多位(wei)點磷酸化肽比例高
相比于常規的實驗流程，磷酸化肽段富集試劑盒PEB可以良好適配自動化流程。結合青蓮百奧最新發布的智慧實驗室——Magic Show，覆蓋從蛋白質提取、質量控制、低豐度富集、還原烷基化、酶解脫鹽到翻譯后修飾富集的樣本前處理全流程。實現磷酸化肽段的高效、自動化富集，進一步降低人為誤差，縮短實驗流程！
青蓮(lian)百奧修(xiu)(xiu)飾蛋白組學產(chan)(chan)品線升級，不僅精心打磨了(le)經典(dian)修(xiu)(xiu)飾產(chan)(chan)品線（如磷(lin)酸化、糖基化、泛素化等），同時開拓(tuo)了(le)一系列新型修(xiu)(xiu)飾產(chan)(chan)品線（如乳(ru)酸化、酰化修(xiu)(xiu)飾、氧化還原(yuan)等）。現憑借先進的(de)(de)高(gao)分辨率、高(gao)靈敏度質譜(pu)技(ji)術，積累了(le)豐(feng)富的(de)(de)修(xiu)(xiu)飾組學研究經驗，提供深(shen)入的(de)(de)生(sheng)物(wu)信息(xi)學分析報告，為科(ke)研工(gong)作的(de)(de)深(shen)入探索和成果的(de)(de)有效轉化提供強(qiang)有力的(de)(de)支(zhi)持。歡(huan)迎咨詢！
參考文獻：
Yao Y, Dong J, Dong M, et al. An immobilized titanium (IV) ion affinity chromatography adsorbent for solid phase extraction of phosphopeptides for phosphoproteome analysis. J Chromatogr A. 2017;1498:22-28. doi:10.1016/j.chroma.2017.03.026
